Vibratome
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Un vibratome est un instrument utilisé pour couper de fines tranches de tissu. Son fonctionnement est similaire à un microtome, mais il utilise une lame vibrante pour couper à travers les tissus. Vibratome est une marque déposée de Leica Biosystems Richmond, Inc..
Description
L'amplitude des vibrations de la lame vibrante, ainsi que sa vitesse et son angle peuvent être contrôlés.
Des prélèvements de tissus frais ou fixés sont incorporés dans de l'agarose à basse température. Le bloc d'agarose gélifié est ensuite attaché à un bloc métallique et sectionné en immersion dans un bain d'eau ou de tampon. Les sections obtenues sont recueillies avec une brosse fine et transférées sur des lames ou des plaques multipuits pour coloration[1].
Avantages
- Pas de nécessité de déshydrater les tissus, ce qui réduit la perte de constituants cellulaires ;
- Pas d'utilisation de paraffine ni de congélation du tissu ;
- Pas besoin de déparaffiner et de réhydrater les coupes avant l'immunocoloration ;
- Moins de risques d'artefacts ;
- Pas de températures élevées ou de traitements chimiques agressifs pouvant entraîner une instabilité des antigènes ;
- Aucune lame de microtome spéciale requise ;
- Diminution de l'autofluorescence des tissus en raison de l'absence de fixation au formol et de paraffine ;
- Réduction du délai entre le prélèvement de tissu et le moment de l'immunomarquage.
Inconvénients
- Au lieu de rubans, des sections individuelles sont coupées et collectées, qui sont plus délicates et plus difficiles à manipuler.
- Les sections sont généralement plus épaisses que celles obtenues avec un microtome ; la pénétration des anticorps et autres réactifs peut être plus lente et donc des temps d'incubation plus longs peuvent être nécessaires. Les sections épaisses peuvent être difficiles à imager au microscope ; elles sont cependant compatibles et parfois même souhaitables en microscopie confocale.
- La fixation des sections de vibratome sur des lames de verre peut être difficile voire impossible, en raison de l'épaisseur des sections[2].
