Réactif de Griess
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Le réactif de Griess est un réactif utilisé en chimie et biochimie pour déterminer la présence et même pour doser les ions nitrites NO2- dans un échantillon. Il s'agit d'une solution incluant : le sulfanilamide (aussi appelé acide 4-aminobenzènesulfonique), la N-(1-naphtyl)éthylènediamine (en) et de l'acide phosphorique[1]. Les réactions successives d'un ion nitrite avec ces molécules produisent un composé azo coloré rouge.
Ce réactif peut-être utilisé pour déterminer les micro-organismes possédant une enzyme nitrate-réductase, en détectant les ions nitrite produits par la réaction catalysée par l'enzyme.
Le réactif de Griess est une préparation, vendue directement par des distributeurs de produits chimiques[2]. Elle est prête à l'emploi pour tester et doser les ions nitrites.
Elle comporte :
- de l'acide sulfanilique à 1% dans une solution aqueuse d'acide phosphorique à 5% (composant A) ;
- du dichlorure de N-(1-naphtyl)éthylènediammonium à 0,1% qui libère de la N-(1-naphtyl)éthylènediamine (composant B)[2]
Utilisation du réactif de Griess en chimie
Les ions nitrite n'absorbent pas dans l'ultraviolet ou le visible. Pour pouvoir les doser, on peut utiliser le réactif de Griess.
Mécanisme réactionnel
Un ion nitrite réagit d'abord, en milieu acide (dû à l'acide phosphorique), avec le composant A (acide sulfanique) pour former un composé de type diazonium R-N2+. Il s'agit d'une réaction de diazotation. Cette molécule intermédiaire d'ion diazonium réagit ensuite avec le composant B (N-(1-naphtyl)éthylènediamine) pour former un composé azo de couleur rouge[1].
Dosage par étalonnage
Le spectre du composé azo obtenu présente un maximum d'absorption à 548 nm[1]. Le dosage par étalonnage par mesure spectrophotométrique permet de déterminer la concentration en ion nitrite d'une solution. Les 2 composants A et B du réactif de Griess doivent être en excès par rapport aux ions nitrite de façon à obtenir autant de composé azo que d'ion nitrite au départ.
