Secuenciación Maxam-Gilbert

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La secuenciación Maxam-Gilbert es un método de secuenciación del ADN desarrollado por Allan Maxam y Walter Gilbert en 1976-1977. Este método se basa en la modificación química parcial del ADN, específica para cada nucleobase, y en la posterior escisión de la columna vertebral del ADN en los lugares adyacentes a los nucleótidos modificados.[1]

Un ejemplo de reacción de secuenciación Maxam-Gilbert. Al cortar el mismo segmento de ADN marcado en diferentes puntos se obtienen fragmentos marcados de diferentes tamaños. Los fragmentos pueden separarse por electroforesis en gel.

La secuenciación Maxam-Gilbert fue el primer método ampliamente adoptado para la secuenciación del ADN y, junto con el método dideoxi de Sanger, representa la primera generación de métodos de secuenciación del ADN. La secuenciación Maxam-Gilbert ya no se utiliza de forma generalizada, ya que ha sido sustituida por los métodos de secuenciación de nueva generación.

Aunque Maxam y Gilbert publicaron su método de secuenciación química dos años después de que Frederick Sanger y Alan Coulson publicaran su trabajo sobre la secuenciación plus-minus,[2][3] la secuenciación de Maxam-Gilbert se hizo rápidamente más popular, ya que se podía utilizar directamente el ADN purificado, mientras que el método inicial de Sanger requería que se clonara cada inicio de lectura para producir ADN monocatenario. Sin embargo, con la mejora del método de terminación en cadena (véase más adelante), la secuenciación Maxam-Gilbert ha caído en desuso debido a su complejidad técnica, que prohíbe su uso en los kits de biología molecular estándar, al amplio uso de productos químicos peligrosos y a las dificultades de ampliación.[4]

El artículo de Allan Maxam y Walter Gilbert de 1977 "A new method for sequencing DNA" fue honrado con el premio Citation for Chemical Breakthrough Award de la División de Historia de la Química de la Sociedad Química Americana para 2017. Se entregó al Departamento de Biología Molecular y Celular de la Universidad de Harvard.[5]

Procedimiento

Métodos relacionados

Referencias

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