Baldassarre Negroni commence sa carrière comme avocat et entre dans le monde du cinéma comme opérateur. Lorsqu'il devient réalisateur cinématographique du muet, il se spécialise dans les mélodrames bourgeois.
Son film le plus important est probablement Histoire d'un Pierrot (1913), une reproduction intégrale de la pantomime musicale de Fernand Beissier, une sorte de tentative de film sonore au temps du muet. La célèbre Francesca Bertini y tient le rôle de récitante.
Dans ses débuts, il travaille pour la Cines, puis fonde la compagnie Celio Film(it). En 1914, il quitte Rome pour diriger à Milan la Société Milano.
Il a été marié à l'actrice Hesperia, rôle principal de beaucoup de ses films.
