SIM培地

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SIM培地(エスアイエムばいち、Sulfide-Indol-Motility medium)とは、腸内細菌の鑑別・確認に用いる半流動培地である。

この培地では、硫化水素 (S) 産生・インドール (I) 産生・運動性 (M) と、インドールピルビン酸 (IPA) の産生が確認できる。

SIM培地の組成
物質
肉エキス 3.0 g
プロテオーゼペプトン 10.0 g
チオ硫酸ナトリウム 0.05 g
L-塩酸システイン 0.2 g
ポリペプトン 20.0 g
クエン酸鉄アンモニウム 0.5 g
寒天 5.0 g
1000 mL

PH=7.4になるように調整する。

上記を加温溶解後、試験管に分注し、綿栓などの通気性のあるもので栓をしオートクレーブ滅菌して用いる。[1]

特徴

  • 本培地は半流動性を持つ培地である。
  • 本培地には、システインとチオ硫酸ナトリウムが含まれており、これらがSalmonella属、Citrobacter属、Proteus属などの細菌によって分解されることにより硫化水素が発生し、培地内のクエン酸鉄アンモニウムの鉄イオンと反応して黒色の硫化鉄を生じる。培地が黒色化した場合硫化水素陽性とする。[1]
  • IPA反応は、ペプトンの中に含まれるトリプトファンの脱アミノ反応で産生されるインドールピルビン酸と、鉄イオンとの反応で確認される。培地の表層部に褐色帯が認められた場合をIPA陽性とする。
  • 運動性は、穿刺した部分から放射状に菌が発育しているかどうかで確認する。穿刺した部分のみの発育の場合陰性、穿刺した部分以上に白濁している場合を陽性とする。
  • ペプトンの中に含まれるトリプトファントリプトファナーゼにより分解されピルビン酸とインドールが出来る。インドールは酸性条件下でパラジメチルベンツアルデヒドと反応し赤色の発色を呈する。この発色を見る為にエールリッヒのアルデヒド試薬や、コバックのアルデヒド試薬を用いる。(なお、このテストは上記の確認が済んだ後に行わなければならない。)[1]

培養の方法

  • 培地は、半流動高層培地を用いる。
  • 培地は使用する前に、無菌試験等を行ない問題の無い物を用いる。
  • 検査を行なう独立コロニーから菌を採取し培地に穿刺する。
  • 平板培地を好気条件下において、35℃で24-48時間培養する。[1]

主な菌の発育の性状

SIM培地における各種性状
菌名硫化水素産生IPA産生運動性インドール
Escherichia coli++
Proteus mirabilis+++
Shigella sonnei
Salmonella enterica++

アルデヒド試薬

脚注

関連項目

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