Good-Puffer
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Eigenschaften
Norman E. Good und Mitarbeiter entwickelten zwischen 1966 und 1980 zwanzig Substanzen zur Verwendung als Puffer.[1][2][3] Im Gegensatz zu anderen Puffersubstanzen sollten Good-Puffer möglichst wenige Wechselwirkungen mit Proteinen, eine hohe Löslichkeit, keine Diffusion durch Biomembranen, einen Pufferbereich zwischen pH 6 und 8, eine geringe Toxizität, eine geringe UV-Absorption, eine Unabhängigkeit der Pufferwirkung von anderen Faktoren, eine kostengünstige Herstellung und eine metabolische und chemische Stabilität aufweisen. Einige Good-Puffer sind Zwitterionen, z. B. Morpholinoethansulfonsäure (MES), 3-(N-Morpholino)propansulfonsäure (MOPS), ADA, BES und Bicin.
Drei der Good-Puffer neigen nur wenig zur Komplexierung von Metallionen, MES, MOPS und PIPES. Piperazin-enthaltende Puffer (PIPES, HEPES, POPSO und HEPPS) können Radikale bilden und sollten daher bei Redox-Untersuchungen vermieden werden.[4][5] In Anwesenheit von Licht, Sauerstoff und HEPES wird Wasserstoffperoxid gebildet, das zytotoxisch wirkt.[6][7] Tricin wird durch Flavine photooxidiert und mindert unter Tageslicht die Aktivität von Flavone-enthaltenden Enzymen. Die Säuren von ADA, POPSO und PIPES sind schwerlöslich. ADA absorbiert UV-Licht unterhalb einer Wellenlänge von 260 nm, ACES absorbiert unterhalb von 230 nm.
Nach Good wurden einige weitere Good-Puffer entwickelt, z. B. AMPSO, CABS, CHES, CAPS, CAPSO.
Vertreter
Folgende Tabelle enthält die effektiven pKa-Werte, die von Good bei 20 °C und bei einer Konzentration von etwa 100 mM gemessen wurden. Die entstehenden pH-Werte sind konzentrations- und temperaturabhängig.[8]
| Puffer | pKa bei 20 °C | ΔpKa/°C | Löslichkeit in Wasser bei 0 °C |
|---|---|---|---|
| MES | 6,15 | −0,011 | 0,65M |
| ADA | 6,62 | −0,011 | - |
| PIPES | 6,82 | −0,0085 | - |
| ACES | 6,88 | −0,020 | 0,22M |
| MOPSO | 6,95 | −0,015 | 0,75M |
| Cholaminchlorid | 7,10 | −0,027 | 4,2M (als HCl) |
| MOPS | 7,15 | −0,013 | hoch |
| BES | 7,17 | −0,016 | 3,2M |
| TES | 7,5 | −0,020 | 2,6M |
| HEPES | 7,55 | −0,014 | 2,25M |
| DIPSO | 7,6 | −0,015 | 0,24M |
| Acetamidoglycin | 7,7 | - | sehr hoch |
| TAPSO | 7,7 | −0,018 | 1,0M |
| POPSO | 7,85 | −0,013 | - |
| HEPPSO | 7,9 | −0,01 | 2,2M |
| HEPPS | 8,1 | −0,015 | hoch |
| Tricin | 8,15 | −0,021 | 0,8M |
| Glycinamid | 8,2 | −0,029 | 6,4M (als HCl) |
| Bicin | 8,35 | −0,018 | 1,1M |
| TAPS | 8,44 | −0,027 | hoch |