Nikki Glaser, fille de Julie E. Burke et d'Edward J. Glaser, naît le 1er juin 1984 à Cincinatti , en Ohio[ 1] . Elle grandit à Kirkwood , une ville du Missouri dans la banlieue de Saint-Louis [ 2] . Inspirée par Sarah Silverman et Jenny McCarthy [ 3] , elle commence à faire des spectacles de stand-up pendant ses études à l'université du Kansas , où elle obtient une licence de lettres en 2006[ 4] , [ 5] .
Elle collabore avec Sara Schaefer pour un podcast , You Had To Be There , qu'elles animent de 2011[ 6] à 2014, et pour deux saisons d'une émission hebdomadaire de troisième partie de soirée, Nikki & Sara Live (en) , sur MTV , en 2013[ 7] , [ 8] . En 2016, elle anime une émission consacrée à la sexualité , Not safe with Nikki Glaser , sur Comedy Central [ 3] .
Nikki Glaser pendant un stand-up en 2016
Ayant joué des scènes de stand-up dans les émissions américaines de troisième partie de soirée animées par Jay Leno et Conan O'Brien , elle participe à l'émission de téléréalité Last Comic Standing [ 9] . Son premier spectacle de stand-up filmé pour la télévision, Perfect , sort sur Comedy Central le 9 avril 2016. Le second, Bangin' , sort sur Netflix le 1er octobre 2019[ 5] . Elle participe aussi à des émissions de roast en se moquant de Rob Lowe en 2016, de Bruce Willis en 2018 et d'Alec Baldwin en 2019 sur Comedy Central[ 10] et de Tom Brady en 2024 sur Netflix[ 5] .
En 2025, elle présente la cérémonie des Golden Globes , où elle est nommée dans la catégorie du meilleur spectacle de stand-up pour Nikki Glaser: Someday You'll Die , diffusé sur HBO Max [ 11] . Ce spectacle est aussi nommé aux Emmy Awards en 2024 et aux Grammy Awards en 2025[ 12] et lui vaut un Writers Guild of America Award [ 13] .
En 2026, elle présente de nouveau la cérémonie des Golden Globes[ 14] .