Microscopie à nappe de lumière
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La microscopie à nappe de lumière (ou SPIM pour Selective Plane Illumination Microscopy, ou LSFM pour Light-Sheet Fluorescence Microcopy) est un type de microscopie à fluorescence basée sur l’illumination sélective d'un seul plan d’intérêt par une nappe de lumière, c'est-à-dire un faisceau laser focalisé dans une direction et collimaté dans l'autre. Celle-ci est généralement créée par une lentille cylindrique et projetée dans l'échantillon grâce à un premier objectif. Les fluorophores situés à l'intérieur de cette nappe de lumière sont excités et émettent de la lumière collectée par un second objectif[1]. Cette illumination introduit naturellement un sectionnement optique, déterminé par l'épaisseur de la nappe, ce qui permet un meilleur pouvoir de résolution axial que les microscopes à épifluorescence pour les échantillons épais. De plus, cette méthode permet d'acquérir d'un coup l'image d'un plan au lieu d'acquérir une image point par point comme c'est le cas dans les microscopes à balayage, et est donc fondamentalement plus rapide. La quantité totale de lumière absorbée par l'échantillon étant plus faible, il en résulte une moindre phototoxicité ainsi qu'un moindre photoblanchiment.
La microscopie à nappe de lumière est aujourd'hui utilisée en biologie cellulaire et en biologie du développement pour l'imagerie d'organismes modèles comme l'embryon de souris[2], de poisson zèbre ou de la mouche drosophile.
